树上的花十分多,散发出淡淡的清香,令我在疲倦的时候解除疲劳,仿佛坠入花海,进入彩色的梦里,让我流连忘返。喜欢花的人非常的多!所以很多人将种植花卉作为人生一大乐趣。只有学习了相关的知识和技巧,才能种好花卉,你在为养花而苦恼吗?经过搜索和整理,小编为大家呈现“花卉植物无菌接种组培技术”,欢迎阅读,希望您能阅读并收藏。

花卉植物无菌接种组培技术-- 1、外植体的选取及预处理 ⑴外植体选取 选取生长健壮、已发芽、长势较好、无病害的植物带芽的枝条作为外植体。 ⑵材料预处理 取带芽的枝条,用洗衣粉适量冲洗,然后扳取或用清洁剪刀剪取带芽部位(约1cm1cm大小),顶芽和腋芽、大芽和小芽分开。继续用洗衣粉清洗10分钟,清洗时需不停晃动。再用自来水冲洗干净,置空培养瓶备用。 2、外植体消毒 ⑴蒸馏水冲洗 外植体置于已杀菌开机的超净工作台上,新洁尔灭洗液消毒双手,用无菌蒸馏水清洗外植体2-3次,需晃动。 ⑵酒精消毒 75%酒精倒入装外植体的容器内,消毒外植体30-60s,时间长短视植物材料情况而定。动作一定迅速,需晃动。然后将酒精倒去。 ⑶升汞消毒 1%生汞倒入装外植体的容器内,消毒外植体5-10min,时间长短视情况而定。需晃动,在最后3min静置,升汞注满容器,将已灼烧的镊子放入容器升汞内浸泡。 ⑷蒸馏水清洗 用镊子将外植体取出,放入另一无菌蒸馏水瓶中清洗,反复清洗4次。 ⑸茎尖的剥离 用灼烧冷却的镊子和剪刀对外植体进行处理,剥离外植体材料芽外部小叶片,露出尖端生长点和2-3片叶原基部分,将此部分剪下做培养材料。再用无菌蒸馏水清洗3-4次。 ⑹接入培养基 培养基瓶放入工作台内,将剥离的材料分别用消毒过的镊子放入培养瓶内,盖上瓶盖,置培养篮内,写上培养时间、操作人及培养品名,入培养室培养。

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红蕉组培技术


红蕉(Red and Green)是汕头市引进的优稀香蕉新品种,属于香蕉属中的AAA群体(红绿香蕉品种)。该品种具有生势壮旺、抗病力强、适应性广等特点,植株高大,假茎高300-350cm,叶片大而厚,叶柄长,生育期长。红蕉组培苗,从移植至开花结果需14个月左右,移植后18个月左右才能成熟。每穗果5-6梳,每梳16个果左右,果指粗短,一般栽培单株产量20-40kg。该产品以其特有的暗紫红色果皮、细腻的肉质以及特殊香味而深受消费者的欢迎。
1 材料的准备

在无传统病害的红蕉种植区,选用生势强健、挂果整齐、产量高的母株,挖取其刚露出地面的吸芽作为诱导材料。

2 吸芽的诱导

剥除吸芽外面的叶鞘,用水冲洗干净。在无菌条件下用75%酒精溶液消毒30秒钟,再用浓度为0.1%的HgCl2消毒21分钟,然后再用无菌水冲洗7-8次,切取其茎尖,将茎尖分成4份,放在MS+BA3-6mg/L+3%糖+琼脂7.5g/L的诱导培养基中,置于黑暗的光照培养箱中,保持温度28-30℃,培养40-50天即可出芽。

3 丛芽的继代增殖

用MS+BA3-6mg/L+NAA0.2mg/L+3%糖+琼脂7.5g/L的培养基进行继代增殖,在28-30℃、1500lx光照环境中培养20-25天即可继代增殖1次,并获得2.0-2.7倍的增殖率。在培养过程中应有充分的光照,每天1500lx光照时间应不少于8小时,如果没有光照或光照不足,则其假茎和叶柄的颜色退淡、转绿甚至变为白色,影响增殖率。继代培养一般不超过12代。

4 生根培养

经一段时间的继代增殖,当芽长到具有3-4片叶、高约3cm时可转入MS+IBA1mg/L+AC0.1mg/L+3%糖+琼脂7.5g/L的生根培养基中,在28-30℃、3000lx光照条件下培养25-30天即可出瓶假植。

5 瓶苗的假植

假植苗采用拱形薄膜大棚栽培。大棚四周覆盖40目防虫网,里层为薄膜,外层为遮阳网,门口应设有缓冲间。基质采用塘泥:火烧土:河沙为1:1:1的混合土。种植前应先将基质淋透,在营养袋中挖1个小洞,将苗根平顺地放入,然后回添干净的河沙,压实,浇足定根水。

假植苗对水分的要求比较严格,前期要求比较高的空气湿度,种植后7天内尽可能保持95%的相对湿度。为保证早发根,提早恢复生长,也可采用内设薄膜小拱棚的形式保持湿度,之后采用干湿交替控制基质水分。在高温、干燥的中午应开门通风,喷水降温、增湿。假值苗生长后期要适当控制水分。由于假值苗生长前期对肥料的要求不高,故采用薄施或叶面追肥如喷施0.2%磷酸二氢钾等就能满足其对肥料的需求。同时应定期喷施防病、杀虫药剂,如每隔10-15天喷施1次氧化乐果和井冈霉素1000倍混合液,假植苗一般可获得95%以上的成活率。小苗长至5-7片新叶、假茎高20cm左右即可出圃定植。出圃前掀开薄膜和遮阳网炼苗3-5天,将更有得于大田种植成活。

植物组培需要的条件


一、温度: 对大多数植物组织20~28℃即可满足生长所需,其中26~27℃最适合。 二、光: 组织培养通常在散射光线下进行。光的影响可导致不同的结果,有些植物组织在暗处生长较好,而另一些植物组织在光亮处生长较好,但由愈伤组织分化成器官时,则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和根。有些次生物质的形成,光是决定性因素。 三、渗透压: 渗透压对植物组织的生长和分化很有关系。在培养基中添加食盐、蔗糖、甘露醇和乙二醇等物质可以调整渗透压。通常1~2个大气压可促进植物组织生长,2个大气压以上时,出现生长障碍,6个大气压时植物组织即无法生存。 四、酸碱度: 一般植物组织生长的最适宜pH为5~6.5。在培养过程中pH可发生变化,加进磷酸氢盐或二氢盐,可起稳定作用。 五、通气: 悬浮培养中细胞的旺盛生长必须有良好的通气条件。小量悬浮培养时巨常转动或振荡,可起通气和搅拌作用。大量培养中可采用专门的通气和搅拌装置。

红花继木组培技术


红花继木的组织培养包括初代培养、继代增殖培养和生根培养。组培技术在红花继木生产上的应用,不仅仅限于组培育苗,还有望通过组培在育种上的应用,解决种间、属间等远缘杂交和杂种胚停止发育的缺陷,使红花继木的种质资源进一步纯化和提高。

1、外植体

选生长健壮、无病虫害的红花继木茎尖、芽及枝等作外植体,其中外植体采集在7~8月最好,污染率较低。

2、培养基

红花继木的组织培养包括初代培养、继代增殖培养和生根培养。试验表明,初代培养和继代增殖培养基可参考MS+BA1.0mg/l+IBA1.0mg/l;生根培养基可参考1/2MS+NAA1.0~1.5mg/l+0.1%的活性炭。

3、培养条件

红花继木的培养条件一般为:温度20℃左右,光照时间14h/d(每天14小时),光照强度为1500LX(勒克斯)。

夜香树的组培技术



摘要:文章研究了以夜香树的带芽茎段为外植体诱导丛生芽的过程,并筛选出其最佳分化增殖培养基为Ms+6-BAO.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3.0%+琼脂0.6%。经过28~42d的培养,其增殖系数为7.5;最佳生根培养基为1/2Ms+IBA0.3mg/L+蔗糖0.15%+琼脂0.6%,生根率为100%,平均根数为5.7条。
关键词:夜香树;组织培养;快繁技术
夜香树又名洋素馨、夜来香、夜丁香,属于茄科夜香树属。常绿灌木.高l一3m。枝条细长而稍弯垂。叶互生,长圆状披针形或狭长圆形,长6~16cm,纸质,全缘,顶端渐尖.基部近圆形。花数多.排成疏散分枝的聚伞花序腋生或顶生;花冠高脚碟状,长约2cm.绿色或黄绿色,檐部5浅裂,夜间极香,故名夜香树。浆果椭圆形,直径5~7mm。熟时白色;具种子l~6粒(多数为2~3粒),长卵形或一侧压扁,直径1~2mm,黑褐色。干粒重6.45g。夜香树原产南美洲。我国福建和云南有栽培。性喜温暖气候。畏寒,喜光.在半阴处亦能适应;较粗生,在沙土上也能生长,但以疏松湿润的沙土壤或壤土生长良好。萌芽力强。花期7一11月.入夜散发浓郁香气;果期冬春季,种子2—3月成熟。夜来香树条细长,夏秋开花.黄绿色花朵傍晚开放.飘出阵阵扑鼻浓香.在南方多用来布置庭院、窗前、塘边和亭畔。鉴于目前夜香树的扦插繁殖耗费大量的原始材料和时间.不适于大规模化生产。组织培养技术的发展为植物的生长繁殖开辟了一条新的途径。培养路线:培养壮苗生根;放风锻炼幼苗;出瓶移栽。直接采用小拱棚大田一步移栽的方式.可获得性状优良的大量种苗。
l材料和方法
1.1材料
原始材料为植物光照实验室盆栽夜香树.选取生长发育良好的母株休眠芽枝段.剪成5~6cm茎段作为组织培养研究的外植体。
1.2实验方法
基本培养基:实验采用MS培养基.其中附加不同细胞分裂素(6一BA)和生长素(NAA、IBA)。所有培养基中激素单位为mg/L,pH值5.8—6.0,琼脂0.6%。
外植体处理:将外植体用自来水冲洗30min.然后在超净工作台上剪成1.5~2.0cm的带芽茎段.采用2次灭菌法.即先用70%的酒精灭菌34s.再用0.1%升汞溶液消毒8min.然后用无菌水冲洗5次,接种于诱导培养基上。
培养条件:培养室温度为22+20C。以日光灯为主光源。光照时间14h/d。光照强度为2500—3000lx。
最佳诱导和生根培养基的筛选:通过添加不同的生长调节物质(6一BA、NAA和IBA).丛生芽诱导处理见表l,芽分化诱导处理见表2。生根培养:从继代培养材料中选取3.0~5.Ocm的有效芽苗.切成1.0~1.5cm的茎段。转入l/2MS+1.5%蔗糖+0.6%琼脂为基本培养基.在附加不同浓度IBA情况下进行生根实验(表3)。一定要去除基部的叶子,因为基部的叶子一经接触培养基就会逐渐变硬、拱起和蜷缩,且极易发根。从而影响正常生根和生长。比较其各阶段芽萌发、增殖系数、生根率等数据。筛选出最佳组合。

兰花组培快繁技术概叙


兰花的繁殖一般可通过分株进行,但繁殖系数低,现在洋兰的商业化生产都是通过试管育苗进行生产,一般可分为种子播种生产实生苗和组织培养生产分生苗两种,各有千秋,下面就其生产流程和应 用进行一些说明:
一、兰花的种子播种: 兰花的果实俗称兰荪,其中有数千到数百万粒种子,因种类不同而异,兰科植物种子的发育较特殊,种子成熟后没有胚乳,需与某些真菌共生,由真菌提供营养才能萌发,在自然条件下,萌发率很低。早期通过人工接种真菌,可以使兰花种子萌发,但技术烦琐,难度较大,后来发现在人工培养基上,不需真菌共生,如果营养成分合适,兰花种子也能萌发生长,一般常用的培养基有KC,VW和京都等,其中京都配方采用花宝花肥为主要的无机成分,配制方便,较适合兰花发烧友使用。 兰花的种子培养是进行兰花杂交育种的必要手段,也是兰花种苗生产的重要技术,如国内目前的蝴蝶兰种苗生产,多数是实生苗,与分生苗相比,实生苗往往不能保证性状的完全一致,因此对亲本的要求就非常高,好的亲本其后代的分离不会很大,好花率可达80%以上。实生苗的生产相对简单,迅捷,以蝴蝶兰为例,由一个好的荚果,播种后两个月左右可产生数万个小原球茎,经过一次分瓶后,就可进行育苗,大约3个月后得到大量可移栽的试管苗。
 
 二、组织培养: 自MORAL于上世纪60年代首次成功进行了兰花的组织培养,目前已有数十个属的兰花进行了组织培养,通过组织培养及克隆技术进行生产的种苗具有与母本完全一致的性状。 热带兰花的组培快繁一般通过诱导产生类原球茎(PLB),通过PLB增殖进行;其起始材料以茎尖分生组织最佳,花梗上的休眠腋芽也是最常用的材料之一, 一些单轴生长的兰花如蝴蝶兰,如取茎尖,往往会失去母株,取花梗就没有这样的担心。
在植物的组织培养过程中常常会发生体细胞无性系变异,这可以做一种育种手段,但对于商业生产而言却是不利的,所以通过PLB增殖时要十分注意去除形态不正常的组织。目前台湾的蝴蝶兰分生苗生产部分采用丛生芽的方法生产, 即通过花梗诱导腋芽生成小芽,通过小芽诱导丛生芽并不断切割增殖,这样生产的种苗基本可以保证与母株性状 的一致。但生产成本高,周期特长,往往需要拥有一定数量的母株来采取花梗。 其实就兰花商品生产而言,通过PLB进行增殖生产分生苗是最有效率的,通过控制,其变异率可以降到非常低的,可以忽略不计的水平。另外幼嫩的花梗也是一种很好的起始材料,可以诱导PLB或不定芽。 国兰的组织培养近年有了很大的发展,春兰、墨兰和建兰等传统名兰都可以进行克隆了,这类地生兰的组培与热带兰不同,是通过诱导产生根状茎,通过根状茎进行增殖,在根状茎前端生成小苗。也有愈伤组织诱 导的报道,但都要通过根状茎的发生阶段。

日照对植物组培的影响


日照对植物组培的影响--植物组培是二十世纪发展起来的一项生物技术,经过几十年的发展,这项技术在基础理论和实际应用方面都获得了飞快的发展。早期的组培报道,多集中于研究各类植物的培养基组成,包括无机盐、有机物、激素等培养基成分的种类和配比浓度。近几年来随着越来越多培养基研究成果的积累,人们的研究逐渐深入到培养条件方面,如培养温度、光照强度、容器内空气因素对组培和培养过程中植物生长速度、生长质量的影响。 组织培养中光照也是重要的条件之一,主要表现在光强、光质、以及光照时间方面: 1、光照强度(lightintensity) 光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响,从目前的研究情况看,光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。一般来说,光照强度较强,幼苗生长的粗壮,而光照强度较弱幼苗容易徒长。 2、光质(lightwave) 光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养,8周后,分化出愈伤组织。但在蓝光下培养,几周后才出现愈伤组织,而唐菖蒲子球块接种15天后,在蓝光下培养首先出现芽,形成的幼苗生长旺盛,而白光下幼苗纤细。据倪德祥等在香石竹的研究表明,白光条件下生长量最高,其次是红、黄、绿、蓝光对生长有抑制作用,单色光对叶绿素合成有抑制作用,叶绿素的合成需要在复合光条件下完成。 3、光周期(lightperiod) 试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养,最常用的周期是16h的光照,8h的黑暗。研究表明,对短日照敏感的品种的器官组织,在短日照下易分化,而在长日照下产生愈伤组织,有时需要暗培养,尤其是一些植物的愈伤组织在暗培养下比在光下更好。如红花、乌饭树的愈伤组织。 除某些材料诱导愈伤组织需要黑暗条件外,一般培养都需一定的光照。

植物茎尖组培实验过程


植物茎尖组培实验过程--1、外植体的选取及预处理 ⑴外植体选取 选取生长健壮、已发芽、长势较好、无病害的生姜根状茎作为外植体。 ⑵材料预处理 取带芽的枝条或鳞茎球茎,洗衣粉适量冲洗,然后扳取或用清洁剪刀剪取带芽部位(约1cm1cm大小),顶芽和腋芽、大芽和小芽分开。继续用洗衣粉清洗10分钟,清洗时需不停晃动。再用自来水冲洗干净,置空培养瓶备用。 2、超净工作台无菌操作准备 检查超净工作台,是否已开机灭菌,酒精灯、酒精瓶、升汞是否齐备、无菌水、培养瓶放置与位置、接种器械是否齐备与放置。 3、外植体消毒 ⑴蒸馏水冲洗 外植体置于已杀菌开机的超净工作台上,新洁尔灭洗液消毒双手,无菌蒸馏水清洗外植体2-3次,需随时晃动。 ⑵酒精消毒 75%酒精倒入装外植体的容器内,消毒外植体5-60s,时间长短视植物材料情况而定,一般幼嫩材料和室内带菌培养材料消毒时间短,老材料或室外材料消毒时间长。动作一定迅速,需晃动,然后将酒精倒去。整个时间计算以酒精倾倒开始至酒精倒出瓶外为止, ⑶升汞消毒 1%生汞倒入装外植体的容器内,消毒外植体5-10min,时间长短视情况而定。需晃动,在最后3min静置,升汞注满容器,将已灼烧的镊子放入容器升汞内浸泡。 10%次氯酸钠溶液倒入装外植体的容器内,消毒外植体10-12min,时间长短视情况而定。 ⑷蒸馏水清洗 用镊子将外植体取出,放入另一无菌蒸馏水瓶中清洗,反复清洗4次。 4、材料的整理 用灼烧冷却的镊子和剪刀对外植体进行处理,剥离外植体材料芽外部小叶片,露出尖端生长点和2-3片叶原基部分,将此部分剪下做培养材料。再用无菌蒸馏水清洗3-4次。 5、接入培养基 培养基瓶放入工作台内,将剥离的材料分别用消毒过的镊子放入培养瓶内,盖上瓶盖,置培养篮内,写上培养时间、操作人及培养品名,入培养室培养。

大岩桐组培快繁技术


大岩桐属苦苣苔科球根花卉,株高12厘米至25厘米,全株密布绒毛叶对生,花顶生或腋生,花冠阔钟形,花多呈白、粉、红、紫等色。花朵大,花色浓艳多彩,花期长,是深受人们喜爱的温室盆栽花卉。可用来装饰窗台、几案、会议室等。

大岩桐传统繁殖方法为播种法、扦插法、分球法等。大岩桐种子极小,每克种子有2.5万粒至3万粒,寿命较短,仅两个月左右。播种繁殖对土壤条件要求高,操作精细,且易发生性状变异、品种退化现象;扦插法虽可保持原品种特性,但繁殖系数较低,不能适应大批量生产的需要;分球法形成的植株又多具有株形不整齐的缺点,生产上亦不常用。基于以上原因,我们从1998年开始尝试用组培法繁殖大岩桐,基本上找到了适合大岩桐诱导、分化和生根的培养基配方和培养条件。

材料与方法供试材料为候毛大岩桐。剪取成年植株的幼叶,用流水冲洗半小时,在超净工作台上进行消毒处理。首先将经过消毒处理的植株幼叶放入75%酒精中浸泡30秒钟,之后用0.1%的氯化汞溶液处理5分钟至8分钟,最后用无菌水冲洗4次备用。以M S为基本培养基,附加蔗糖30克/千克、琼脂6克/千克及不同种类和浓度的激素,在PH值为5.8、温度为18℃至20℃条件下进行诱导、分化、生根培养。

诱导和分化将消毒后的幼叶切成0.4平方厘米至0.5平方厘米的方形小块,接种到附加2毫克/千克的6-BA、0.2毫克/千克的N AA的M S培养基上(苄氨基嘌呤BA为一种利于长的细胞分裂素,荼乙酸N AA为一种促进生根的生长素)在25℃愈伤组织,40天后少数愈伤组织上可分化出幼芽。

继代培养将愈伤组织块上分化出的幼芽切下,转入继代培养基上,继代培养基附加1毫克/千克的6-BA、0.1毫克/千克的N AA,培养温度为25℃,每天在1000LX至2000LX光强下连续光照12小时。一周后幼芽发育,并在基部形成大量芽体,一般一个月可长满培养基面,一个月应转移一次。

生根培养将继代培养中苗高达2厘米,有3片至4片完整叶片的小植株,转移到生根培养基上,生根培养基为1/2M S,附加1毫克/千克的I-BA(IBA为一种生长素)。培养条件与继代培养一致,2周后有根长出,可炼苗移栽。

炼苗与移栽影响大岩桐的移栽成活率的关键是控制好温度和湿度,大岩桐要求生长在高温、潮湿及半阴环境,通风不宜过分,要保持较高的空气湿度。移栽前先闭瓶炼苗1周,洗净根上附着的培养基,栽入装有蛭石的营养钵中,蛭石用0.5%的K M nO4消毒。搭塑料小拱棚保湿,棚上架遮荫网,保持棚内温度20℃至25℃,两周后逐渐揭开塑料薄膜,一个月后可定植上盆,常规培养5月至6月即可开花。

大岩桐组培快繁技术,比传统的播种法、扦插法、分球法繁殖系数高,植株整齐一致,由于是无性繁殖,其性状没有明显的分离。能保持原品种特色和降低繁殖成本。但继代培养过程中发现,同样是在1毫克/千克的6-BA条件下,有部分试管苗发生玻璃化,失去分化能力,而低于1毫克/千克的6-BA,分化数量明显减少,6-BA的适宜浓度有待进一步探讨。

最新铁皮石斛组培苗移栽技术



铁皮石斛又称黑节草,属兰科石斛属,是一种珍贵的野生药用植物。其有效成分主要为石斛多糖、石斛碱、氨基酸等,其中石斛多糖含量高达21.7%,能显著提高机体免疫功能,具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效。现代药理学研究发现,石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用。
铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境,常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限,且经长期人为采挖,野生资源濒临灭绝,因而国内市场供应紧缺,国际市场每公斤干品价已达1000美元以上。
铁皮石斛自然繁殖率极低,通过组织培养快速大量繁殖铁皮石斛组培苗成为解决种苗问题的有效途径。虽然铁皮石斛组培苗移栽方面的相关报告很多,笔者也才曾按照这些报告去操作,但移栽成活率最多只有60%,且操作麻烦,不能从根本上解决成活率低的问题。笔者认为主要原因是不易满足铁皮石斛组培苗生长环境的特殊要求,尤其是水分和透气两方面因素不易控制,稍一操作不当,就易死苗。笔者的研究表明,通过搭建高架种植畦来移栽铁皮石斛组培苗,非常简单地解决了以上难题。因在高架畦上种植铁皮石斛组培苗,可以随时喷雾浇水,随时排走多余水分,不会因为水分太多而造成烂根死苗,而且能保证根系通风透气,因而移栽成活率大大提高,能达到95%以上。这一技术为大面积人工栽培铁皮石斛提供了可靠的技术依据。
1移栽前的准备
1.1炼苗
移栽前先将瓶苗至炼苗房进行2~3周的炼苗,让瓶苗从封闭稳定的环境向开放变化的环境过渡,慢慢适应自然环境,等瓶苗生长健壮、叶色正常,根长3cm以上,肉质茎有3~4个节间、长有4~5片叶,叶色正常,根长3cm以上,有4~5条根,根皮色白中带绿,无黑色根,无畸形,无变异。
1.2出瓶
组培苗出瓶时,打开瓶塞将培养基与小苗一起轻轻取出,整齐放置于盆中待清洗,污染苗、裸根苗或少根苗分别放置。正常组培苗先在自来水中洗净培养基,特别要洗掉琼脂,以免琼脂发霉引起烂根,再换自来水清洗一次。裸根或少根组培苗经过上述清洗后,还需将小苗根部置于100mg/L的ABT生根粉中浸泡15分钟,以进行生根诱导。污染苗经过清洗后,用1000倍多菌灵浸泡整株小苗10分钟。后期管理得当可有效控制污染的发生。
1.3基质的准备
移栽铁皮石斛组培苗要选择适宜的基质。铁皮石斛的根是气生根,有明显的好气性和浅根性,因此,要求基质以疏松透气、排水良好、不易发霉、无病菌和害虫潜藏者为宜。可以选择水苔、石灰石、碎砖、树皮、刨花、蕨根、板边、菌糠、木糠等为移栽基质。

非洲菊切花组培繁苗技术


非洲菊为多年生草本花卉。叶片长椭圆形,边缘有钝齿,全株被细毛。其花序为头状单生,花朵直径8至12厘米,单瓣或重瓣,花色极为丰富。花茎于根抽出,高30至60厘米,挺拔妖艳,花期长。除7月至9月上旬高温不开花外,其他时间均可开花,鲜切花插置时间也长。但非洲菊中上乘品种多为F1代,很少授粉结籽。想要保持种性不变,最好是采用组织培养繁苗。现将非洲菊组培技术介绍如下:
外置体的选取 选择品种纯、花色好、无病虫害的健康植株,剪取株体内部新叶(淡黄绿色)。将叶柄两侧叶片用消毒剪刀剪去,并将其叶柄剪成0.5厘米一段,放入消过毒的三角瓶中待用。(用叶片或花蕾作外置体也可以)。
培养条件 ①诱导芽培养基:MS+IBA(0.5至1);②继代培养基同①;③生根培养基Nb+BA(0.5至1)+IAA(0.5至1),琼脂0.8%至1%,蔗糖3%,pH5.8至6.0;培养温度20℃至22℃,光照强度1500至2000勒克斯,光照时间一天10至12小时。
不定芽诱导及生根培养
将三角瓶中备好的外置体,用70%酒精和0.1%干汞进行灭菌消毒,并用无菌水冲洗干净。在灭菌灯下,分置于盛有培养基①的三角瓶中,培养35天。当其愈伤组织分化出丛状芽团时,将芽团在无菌条件下切成小块,转置到盛有培养基②的三角瓶中断代增殖一次。25至30天后当增殖体1至2厘米高时,再切取增殖体0.5至1厘米,将其转置于盛有培养基③的瓶中进行生根培养。保持室温在22℃,经25至30天培养即可生根。由诱导、继代增殖到生根,共需90至95天。
炼苗移栽 当瓶内苗根长1.5至2厘米时,将苗瓶放置到栽植处3至5天,开瓶使小苗完全适应栽植地环境。然后将瓶苗移出,洗净根部培养基,按4×3厘米栽于假植床里。假植床下层为粗沙、中层为筛细的腐殖土、上层为细沙,并用0.2%高锰酸钾消毒。栽后用微喷法浇透水,前10天湿度保持80%,温度18℃至22℃。当菊苗长出3至4片叶后,按5×厘米将其移栽到土质疏松肥沃的假植床内。待苗高10厘米时,按25×20厘米定植,进行正常管理。从组培到定植,大约需7至8个月时间。

美国红栌温室组培苗稆栽技术



美国红栌([?otinuscoggygr缸‘Roya_1purple’)为漆树科黄栌属,是美国黄栌的

一个变种。美国红栌在自然状态下一般采用种子繁殖,但播种苗分化现象比较严重。而其组培苗特点是茎干过于纤细,叶片极易失水,我们在移栽试验初期成活率不足50%,极大限制了该技术在实际生产中的应用。为解决这一问题,我们主要在组培苗瓶炼时间、栽培基质配比等方面进行了试验,使美国红栌的组培苗移栽成活率达到了90%以上。现将试验结果总结如下。

1瓶炼时间对美国红栌组培苗移栽成活率的影响

组培苗瓶炼时间指组培瓶苗自恒温培养间移到温室后,到移栽之前,在瓶内炼苗的时间。本试验分别采用瓶炼时间6、8、10、12、14d5个处理,来观察其对移栽成活率的影响。试验栽培基质为国产草炭与珍珠岩,按1:1比例配制。试验中组培苗移栽成活标准为苗木顶芽抽出新梢,根部新根形成。根据该组培苗在移栽过程中的实际生长表现,一般为15~20d长出新根。为确保调查数据的可靠性,移栽成活率的调查时问选在移栽后1个月进行。

通过对不同炼苗时问的组培苗移栽后的成活率和苗木高生长情况的调查结果看,不同炼苗时间对苗木的成活率和高生长的影响差异显著。组培苗瓶炼时间效果比较好的为10d,成活率达80%以上,高生长也达到了8cm以上,这说明美国红栌组培苗经过10d炼苗后,已具有较强的适应外界环境能力。炼苗6d的组培苗,叶片颜色嫩绿,极易失水萎蔫,表现出

明显的炼苗不充分。而炼苗时间为14d的苗木,根系过长,移栽过程中容易造成窝根,影响移栽效果。另外炼苗时间过长,根系颜色变褐,表现一定程度的老化,不利于新根的形成。

2不同栽培基质对组培苗移栽成活和生长的影响

为了筛选出经济有效、比较适合美国红栌组培苗生长的栽培基质,该试验共设计了6种配方进行试验。试验基质按比例混匀,并喷洒o.1%辛硫磷、o.125%多菌灵溶液消毒,充分搅拌后,装入6cm长的无纺纸育苗袋。该试验用的组培苗瓶炼时间为10d。试验结果见表2(本刊略)。

表中数据表明,不同栽培基质下美国红栌组培苗的成活率和高生长有显著差异。国产草炭和珍珠岩按3:3的比例混合效果最好,平均成活率可达83%,平均苗高为8.60cm;效果最差的是国产草炭和珍珠岩3:1的比例,成活率仅为62.33%,平均苗高为7.35cm。可能因国产草炭含有较多泥沙,按3:1比例混合的基质,透气性较差,从而影响根系呼吸,不利于新根生长发育。对于进口的芬兰草炭与珍珠岩混合基质来说,以3:2配比基质的苗木生长最好,平均成活率可达95%以上,苗高达到13.87cm,而3:3比例混合效果最差,成活率为88.67%,平均苗高11.64cm。这可能因为该基质按3:3比例混合,保水性较差,吸热又多,若供水不及时,易造成根系萎蔫枯死,限制了苗木的成活和生长。总之,采用芬兰草炭做为组培苗移栽基质,从苗高及成活率上都明显高于国产草炭。这与2种基质的工艺流程及成分含量不同有关。芬兰草炭中植物生长必须的速效磷、速效钾、阳离子交换量、有机质、氨态氮等指标明显高于国产草炭土,营养丰富,有利于苗木吸收,而且该介质中还含有一定的生理活性物质,能促进苗木生长。另外,就外观看芬兰进口草炭加工比较精细,介质材料均匀、干净,有利于组培苗根系的呼吸代谢,故缓苗快,成活率高;国产草炭加工较粗,含泥沙较多,透气性较差,不利于根系生长,但其生产成本较低。

3小结

通过试验,总结出了美国红栌组培苗的优化配套移栽技术,其技术要点如下:

(1)组培苗的炼苗时间组培苗炼苗时间可根据组培苗叶片的形态表现来判断。炼苗之前叶片颜色嫩绿且薄,极易失水萎蔫,炼苗后叶片厚度增加,颜色深绿,对湿度降低引起的水分胁迫已初步具有了一定的抗性,叶片比较伸展,具有较强的适应性,从而大大提高了试管苗的移栽成活率。美国红栌组培苗适宜的炼苗时间为10d。

(2)移栽基质的选择组培苗移栽初期,是它的缓苗期,也是它再生根的过程。

而根部生长点对于栽培基质营造的微环境特别敏感,当栽培基质中的水、肥、气三者的关系协调失衡时,会阻碍其正常生根,影响苗木的成活率。试验表明,美国红栌组培苗的移栽均采用草炭土为基本栽培基质,并配以一定比例的珍珠岩。国产草炭与珍珠岩按3:3比例混合,美国红栌组培苗移栽成活率可达80%以上;采用进口芬兰草炭与珍珠岩按3:2的比例混合,其移栽成活率可提高到90%以上。

(3)组培苗移栽技术将经过充分炼苗的组培苗从瓶中小心取出,用清水洗净根系上的培养基,用质量分数为80%的百菌清o.1%的溶液浸泡10rain,以提高苗木抗病性,然后将组培苗小心移栽到基质中。移栽前栽培基质要浇透水,并用新植霉素O.025%药液均匀喷洒基质表面,可有效预防苗木立枯病的发生,而采用常规的0.3%高锰酸钾溶液喷洒基质表面,预防效果不佳。初期注意喷水保湿,对湿度在80%以上,移栽1周后可逐步降低相对湿度。温度保持在18~25℃和适宜的光照强度,是组培苗移植适宜的环境条件。

家庭春兰组培快速养殖


20世纪70年代以来,科研院所已在兰科植物中采用生物工程技术养殖兰花,其效果是传统方法无法媲美的。笔者尝试在家庭环境里开展此项工作,已获得小批量的春兰试管苗。现将具体做法介绍如下,供兰友们参考。①建立小型家庭组织培养室,自制设备,简易土法上马。众所周知该项工作要在无菌条件下进行。为此,必须研制密封良好的玻璃接种箱、净化空气装置,采取种种技术措施,以降低转瓶污染率。用酒精喷雾降尘,成功率上升为92%,这就给筛选最佳培养基配方赢得时间,奠定了良好的基础。②在家庭环境里如何才能做到无菌操作呢?笔者着重从以下几个方面入手:所有接触培养基、能耐高温的器皿用干热法(140~150℃)处理,对不耐高温的用具采用化学方法灭菌消毒。 为解决接种时需在火焰上进行的问题(因箱内几乎无空气),增添了一只30瓦的电炉,但因温度高易灼坏外植体,故又加设了通风降温的设施。  为了减少刀具第二次在环流中污染,高温涌毒后安放在一端封闭的筒内,同时不断鼓入净化的空气加以冷却,确保外植体安然无恙地进入营养基瓶中。 所有进入箱内的物品均需酒精消毒后才放进,凡是带菌者不许人箱。箱体消毒程序是酒精喷露后紫外线消毒,并定期用甲醛加高锰酸钾进行熏蒸…… ③选用适宜的培养基四方。诱导一分化一生根均采用MS基加萘乙酸、细胞分裂素。但不同的生长阶段还需做成分上的调整,特别是生根时由于兰生根较其他品种花卉难些,故采用高浓度的NAA浸泡数秒的做法,效果良好。 ④外值体的采取、消毒。外植体以长根的幼苗(未展开叶),随采随接种最好,成活率较高(接种时节以10月至次年2月最好)。外植体消毒,笔者采取0.1升汞加0.l%浓盐酸多次消毒的办法,效果更佳。 ⑤培养环境。光照1000~2000勒,10~16小时,培养湿度26℃土2℃,空气湿度应控制在较低的水平(70%~80%),否则极易再一次污染。 几点体会: ①在家庭中建立小型组培宜是可行的,它的投资少(可充分利用家中的条件)。笔者从筹备到进行试验只花去数百元,该试验设备也可用于开展其他品种(如木本、药用植物等)的研究工作。 ②无菌操作必须从思想上重视,操作上谨慎才是。否则损兵折将,后果不堪设想。 ③目前因手边无实体显微镜,只能做以芽生芽的试验。采取一些措施如分期切制样品、液体加旋转床的方案,是取得大批量类原球茎的一种途径,其养殖速度也会有所突破。
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